肉芽腫性曼氏桿菌病探針法熒光定量PCR試劑盒公司正在出售的產品:脫氧核糖核酸緩沖液25克
333,2二甲氧基4二硝基本 %1,2DImetxOXY4,5BENZENE
L2基10gRT
鉍(III) 五水合物 Bismuth nitrate pentah
333,2二甲氧基4二硝基本 %1,2DImetxOXY4,5BENZENE
L2基10gRT
鉍(III) 五水合物 Bismuth nitrate pentah
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產品特點:
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
關鍵詞:肉芽腫性曼氏桿菌病.探針法.熒光定量PCR試劑盒
產品名稱:肉芽腫性曼氏桿菌病探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mannheimia granulomatis
貨號:GOY-M3446
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。產品特點:
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR實驗方法步驟:
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。產品僅用于科研
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
肉芽腫性曼氏桿菌病探針法熒光定量PCR試劑盒實時熒光定量PCR:
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的:
1)Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時,剛剛進入真正的指數擴增期(對數期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現性好,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄為止定量準確,重現性好的定量方法,已得到全的公認,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多域。
精酸葡萄糖斜面瓊脂(AGS)于的復合生化試驗(SN標準)
ModifiedFreyMedium
DG-18瓊脂 DICHLORANGLYCEROL (DG-18) AGAR 250 用于食品中霉菌和酵母菌分離培養(Acumedia方法)
乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂LMG250g/瓶用于大腸菌群濾膜法檢測incubationmedia乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂LMG250g/瓶用于大腸菌群濾膜法檢測
哥倫比亞血瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于營養要求高細菌的分離、培養和溶血試驗
OGYAgar
改良MC培養基 250(g) incubation media 改良MC培養基 250(g)
NZYM瓊脂 NZYM Agar 100克 BR
匹克匹克氏肉湯基礎A于溶血性鏈球菌的增菌培養(GB標準)incubationmedia匹克匹克氏肉湯基礎A于溶血性鏈球菌的增菌培養(GB標準)
纖維二糖 5 每1克本品無菌添加于100ml
50100 牛膽鹽 BR 100g 細菌培養基的選擇性抑制劑 incubation media 50100 牛膽鹽 BR 100g 細菌培養基的選擇性抑制劑
50110 豬膽鹽 BR 100g incubation media 50110 豬膽鹽 BR 100g
50120 3號膽鹽 BR 100g incubation media 50120 3號膽鹽 BR 100g
50130 去氧膽酸 BR 100g 細菌培養基的選擇性抑制劑 incubation media 50130 去氧膽酸 BR 100g 細菌培養基的選擇性抑制劑
N-H 小鼠骨髓瘤淋巴細胞
絨毛間充質成纖維細胞
表皮黑色素細胞-淺色素(HEM)( 5×105 )
胎盤絨膜癌細胞;BeWo 大鼠膀胱成纖維細胞完全培養基 100mL
髓母細胞瘤細胞;Daoy
TNFSF13B Others Human BAFF / TNFSF13B 細胞裂解液 (陽性對照)
關鍵詞:肉芽腫性曼氏桿菌病.探針法.熒光定量PCR試劑盒